| 高亲和Ni-NTA纯化介质(Cat.No.L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制 |
| 备而成。NTA能够通过四个位点牢固的螯合Ni2+从而减少纯化过程中Ni2+泄露到蛋白样品中。本纯化介质可以纯化任何表达系统(原核,酵母,昆虫细胞和哺乳动物细胞等表达系统)表达的天然或变性的His-标签蛋白。结合在介质上的蛋白可以通过低pH缓冲液、咪唑溶液甚至组氨酸溶液洗脱下来。 |
每毫升柱体积介质可以结合不低于20mg的6xHis-标签蛋白(50kD)。 |
pH3~13条件下稳定(在pH 2~14条件下也可保持短期稳定) |
纯化介质可重复再生利用多次 |
可以和蛋白纯化过程中通常所所需的多种试剂兼容,见 |
图1E. coli细胞30kD可溶性重组His标签蛋白Ni-NTA Resin纯化对照 |
| 下表 |
Lane1:流出液(某公司) |
Lane5:流出液(金思特) |
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Lane2:洗涤液(某公司) |
Lane6:洗涤液(金思特) |
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Lane3:洗脱液(某公司) |
Lane7:洗脱液(金思特) |
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Lane4:残留物(某公司) |
Lane8:残留物(金思特) |
变性剂 |
表面活性剂 |
还原剂 |
盐 |
其它 |
| 6M Gu·HCl |
2% Triton X-100 |
20mM β-ME |
50% glycerol |
4M MgCl2 |
| 8M Urea |
2% Tween 20 |
10mM DTT |
20% ethanol |
5mM CaCl2 |
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1% CHAPS |
- |
1mM EDTA |
2M NaCl |
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